Množení pomocí přímé morfogeneze

Indukce tvorby prýtu přímo na explantátu

Tato metoda mikropropagace patří mezi zajímavé tím, že koeficient množení je poměrně vysoký. Je možné ji však užít pouze u  poměrně malého druhů rostlin. Patří mezi ně lilie, begónie, hyacinty, některé rosnatky, mucholapka a především nejčastěji publikovaná Saintpaulia - africká fialka. Principem je tvorba adventivních pupenů a následně prýtů, přímo na explantátu /list , cibule, stonek, oddenek/. Většina rostlin vyžaduje ke startu kombinaci cytokininu s nižší koncentrací auxinu. Ale třeba lilie potřebuje k stimulaci auxin. Dostáváme se opět ke známému, každá rostlina vyžaduje něco jiného, no a v tom je krása TC.

Odvození sterilní kultury z lístku je možné vyvolat například
u Drosery dielsiany či Drosery rotundifolie

Drosera dielsiana - tvorba adventivních pupenů a následný růst prýtu na lístku

Drosera  dielsiana

   

Drosera  rotundifolia

Odvození kultury ze segmentu stonku květenství Drosery capensis

   

Dionaea muscipula – reakce patrná v  pasti a v druhém případě v bazální části listu v ploše svrchní epidermis.

   

Solanum – prorůstání prýtů z řezné plochy stonkového segmentu

Postup mikropropagace budu demonstrovat na segmentech z lístků africké fialky. Po sterilizaci lístku a jeho opláchnutí od zbytků desinfekčního činidla, lístek v boxu rozřežeme na segmenty rozměru cca 15x15 mm a umístíme svrchní stranou na povrch živného média.

Saintpaulia

 

 

Explantát rozměru cca 15x15 mm umístěn na živné médium.

Iniciace

   

   

Postupné prorůstání prýtů v ploše explantátu.

Po rozdělení rostlinek a přesazení na čerstvé médium je růst velmi intenzivní.
Množitelský koeficient je u těchto technik vysoký.   

Od umístění lístku na médium uběhlo 6 měsíců, do dalšího kola postupuje 12 kontejnerků.

 

Zakořeňování a aklimatizace

 

Aklimatizované – nároky fialky na osvětlení jsou nízké,

Snažit se o vytvoření funkčního kořenového systému v podmínkách in vitro je neekonomické. Fialka velice ochotně po ošetření báze stimulátorem zakořenění v podmínkách ex vitro, při postupné aklimatizaci na sníženou vlhkost prostředí.

 

zaléváme do misky a čekáme až nás překvapí svým květem.

 

 

Tato technika patří také mezi ty méně bezpečné. Při této metodě  se častěji můžeme setkat se vznikem  mutantních regenerantů. Velmi snadno na bohatších médiích tvoří kalus a následně z něj regenerují rostlinky. Příklad mutace, který byl  zobrazen v čl. 3. tohoto elaborátu, měl postupně tento vývoj.

   

Postupně odrůstající nové lístky se barví do žluta

 

Zůstávají pouze drobné zelené fragmenty

Africká fialka snáší poměrně dobře i tvrdší sterilizaci a celkem i přehmaty při  sestavování médií. /Roste i pod kobercem./ Tím je vděčnou pro učení práce v aseptickém prostředí.

 

  * *

K dalšímu příkladu mutace je možné uvést lístek mucholapky, který je v bázi pasti rozdvojen a tvoří trojúhelníkovitý útvar .  V řadě případů, jako v posledních letech uváděná mutace chlupaté Pom-Pom, může dojít k tomu, že se v průběhu dalšího růstu vrátí do původní podoby.

Tuto zajímavou mutaci rosnatky se bohužel nepodařilo udržet